考博试题与复习策略剖析:分子生物学和基因工程

根据我的分析，各地各院校的《分子生物学》和《基因工程》考博试题大体由以下四部分组成：

①基础概念与理论

②技术思路与实验方法

③热点与前沿问题

④与专业方向或所报院校研究领域紧密相关的内容

其中以①、②比重较大，而③、④比重较小，且各地各年度变化较大。

对“①基础概念与理论”的复习，需要以一本硕士生用的《分子生物学》和《基因工程》课本为主，扎扎实实去抠、去啃，但也不要以为用一种课本就能应付考试。须知不同课本存在有无、详略等差异，要适当补充和参考其它同类课本和专著内容。

复习“基础概念”要注意英文术语和中文术语对应起来，还要注意注重相似或相近名词的辩析。比如：如限制性内切酶、增强子、转座子、cDNA、cDNA文库、基因组文库、Ti质粒、T-DNA、有义链、Pribnow盒、反式作用因子、顺式作用元件、拼接体、α互补、锌指结构、锌指蛋白、分子伴侣、酵母双杂交、基因打靶、RNA编辑、基因芯片、RNAi、Western blotting、RT-PCR、Kozak sequence、SD sequence、CpG island、CTD of RNA Pol II、SiRNA、attenuator、oncogene、gene knock-out、molecular hybridization、human genome project、Restriction fragment length polymorphism，及终止密码子和终止子、Poly A 和Poly A signal、Operon 和Operater、cis调控和trans调控、琥珀突变和琥珀校正等。

“基础理论”部分有些是要求回答原理或机制的，有的则要求结合例子论述的，有些是宏观（全局）问题，有些则为微观（细节）问题。因此在复习“基础理论”时，宏观和微观、原理和实例都要照顾到，并在复习和答题时加以注意。

要求回答原理或机制的类型题如：

1、质粒的不相容性和相容性的分子基础机制 。

2、G蛋白的结构特点信其功能

3、核酸电泳常用的染色剂及作用机理。

4、列出真核基因5′上游激活基因转录的元件并详细介绍

5、SD序列和Kozak序列分别予以介绍

6、试述核型intron拼接中spliceosome的形成及拼接简单机制

7、apoptosis的特征与其生理及病理意义

8、简述转录因子Leucine Zipper Protein的结构和功能

9、从分子水平上解释多抗、单抗的产生？怎样理解产生抗体的多样性？

10、聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖电泳在DNA电泳中有何不同和特点。

11、Sanger原理双脱氧法测序的基本原理是什么？

12、Southern印迹的基本原理及其应用。

13、试述两种转基因方法并说明其原理。

14、试述双元载体的概念及其构件原理。

15、试述AFLP的原理及其应用。

16、试述Phagmid和cosmid作为载体的特点。

17、试述σ因子和ρ因子在转录过程中的作用。

18、试述16srRNA的分子大小、结构特点和生物学作用。

19、何谓双元载体，简述其组装过程及其作用机理？

20、基因组DNA有时会产生G：T错配，DNA复制时有时会发生A：C错配，他们产生的原因是什么，各怎么修复？

21、大肠杆菌的启动子（或操纵子）活性有无强弱之分，如果有，决定其强弱的因素什么？

22、有哪些第二信使，其来源以及在转录种的作用。

23、什么是基因印记（imprinting），它是怎么遗传的？举例说明。

24、为什么说“ribosome is a ribozyme”? （

25、试述Z-DNA和回文序列的结构特点和功能的。

26、转录过程中进行起始定位的因子是什么？该因子在转录全过程是否都存在？为什么？现已经体外科隆并纯化该蛋白，它能否单独与DNA结合？为什么？

27、什么是“epigenetic mutation”？如何导致的？

28、为什么核酸和蛋白都是有方向的?

29、试述信号转导的cAMP通路 。

30、什么是内切酶的星号活性 ？

31、可以磷酸化的氨基酸是哪三个？

32、带苯环的氨基酸是哪三个？

33、DNA在多少nm有最大的光吸收，为什么?

34、转座子标签法克隆植物基因的原理。

35、在DNA复制过程中会形成一种复制体（replisome）的结构，它是由哪几部分组成的？

36、AP-PCR和普通PCR的区别。

37、RNAi（RNA干涉）的作用机理和应用。

38、试述基因芯片的种类和工作原理。

39、叙述功能基因组学的内容与意义。

40、试述植物基因组和动物基因组结构有何区别。

41、试述RNA的自我剪切有几种方法其过程。

42、试述如何评价转基因安全性。

43、简述真核生物基因表达的主要调控环节和蛋白质合成后靶向运送的类型

44、试述真核生物与原核生物转录的区别。

45、试述生物膜有那些主要的生物功能清举例说明膜蛋白参与那些重要的生命过程。

46、酶调控是代谢调控的实质，为什么? 试述酶水平调节层次。

47、DNA片段可能含编码多肽链的前几个密码子：

5′—CGGAGGATCAGTCGATGTCCTGTGTG—3′

3′—GCCTCCTAGTCAGCTACAGGACACAC—5′

1) 哪一条链可能为模板链？

2) mRNA的顺序？

3) 编码的mRNA能形成二级结构么？

4) 翻译从哪里开始，哪个方向进行？

5) 这条DNA片段最可能从原核还是真核细胞中分离出来的？

有些则要求结合例子论述的，这类型题如：

1、以乳酸操纵子为例说明基因表达与阻遏。

2、基因工程基本过程，结合专业举一个实例并说明意义。

3、肿瘤病毒致病的机制，试举例说明。

4、以拟南芥或玉米为例，说明转座子标签法进行基因转移的原理。

5、动物基因与植物基因有哪些异同点，并结合实例加以说明？

6、真核生物转座子有哪些类型，结合实例说明其在生物进化中的生物学意义？

7、试结合实例阐明基因沉默的主要原因。

8、生物大分子之间的相互作用是生命现象的具体表现，试以蛋白质之间以及蛋白质与核酸分子之间的相互作用为例加以说明。

9、何谓蛋白质的磷酸化和脱磷酸化，试以实例说明其对生长和发育的调节的作用
10、什么是选择性剪接？举例说明其在发育调控方面的意义。

11、如何提高转基因的表达水平？试举例说明。

在复习“②技术思路与实验方法”，学生必须熟悉教材上所举的经典实验例子，也要复习常用的分子生物学实验方法及其应用，如可阅读《分子克隆实验指南》、《现代分子生物学实验手册》等，另外平时多读期刊论文，并注意其实验方法和思路。虽然理论考试不会考你实验细节，但研究思路和实验设计却是常常考的问题。例如：

1、研究DNA与蛋白质相互作用的方法有几种。

2、如何提高外源基因片段在原核细胞中的表达量？

3、已知某基因与某蛋白能够相互作用，设计实验证明并找出作用位点。

4、已知某蛋白存在翻译后磷酸化修饰，设计实验证明并找出磷酸化位点。

5、给定一个cDNA序列，如何表达，纯化到蛋白质？

6、手中有一个EST序列，怎样找到与之匹配的基因，并研究其功能？列举3种方法。

7、给定一个组织，简述如何构建cDNA文库。

8、简述基因敲除小鼠模型的策略。

9、克隆了一个新基因，设计实验证明该基因内含4个intron 。

10、用实验证明原核生物和真核生物基因结构的差别。

11、如何用实验证明了核酸是遗传物质？
12、试述转座子标签法克隆目基因。

13、试述定位克隆技术。

14、目前已克隆转录因子有那些，采用什么方法克隆？

15、用于植物动物的基因转移方法有何区别？

16、获得某一基因，如何得知其功能？

17、什么是宏基因组？基本研究路线策略如何？

18、基因a序列已知（其上游序列亦已知），在它上游（-370bp）存在-ggtcat-的调控元件，证明该调控元件中每个碱基在调控中贡献可能不同。

20、用微球菌核酸酶酶解染色质，然后进行电泳，发现200 bp、400 bp、600 bp、800 bp……的条带，试问从该现象可以得出什么结论？

21、在古细菌和动物细胞中各有一种蛋白质，已知它们的cDNA 3′端序列，设计试验分别找出其5′端序列。

22、已知某质粒中克隆了一段序列（s-d），这段序列两端为两个不同的酶切位点（同尾酶s、d位点），序列附近的质粒序列中有另外一个酶切位点，请设计试验，克隆出四个首尾相连的s-d序列的质粒

23、怎样将动物基因转入到植物体中，写出具体步骤，并结合实例说明提高动物基因在植物体中高效表达的策略？

在复习“③热点与前沿问题”部分时，要注重平时对分子生物学期刊的浏览，了解最新的进展和热点，比如当下较热的有基因组学、蛋白组学、转录组学、表观遗传学、染色质水平调控、微RNA、小RNA等。

在复习“④与专业方向或所报院校研究领域紧密相关的内容”时，要注意你所考的专业方向或所报院校研究领域。这里不再赘述。

另外，注意考试题型，如果除名词解释、简答题、论述题外，还有埴空题、判断题目，则需要看书更加仔细，不漏过任何一个重要的细节，如：

1、II型核酸内切酶的产物是？①5′粘末端②3′粘末端③平末端④以上都有

2、T4-DNA连接酶连接的最适温度是？

3、纯化或抽提DNA时，DNA存在于哪一相中？

4、琼脂糖凝胶电泳中DNA被降解的特征有那些？