《基因工程》复习大纲
一、考试性质
基因工程研究生入学考试科目是为我校招收生物工程专业硕士研究生而实施的水平考试，选拔具有较全面的基因工程理论知识和操作技术的学生。其指导思想是有利于国家对高层次人才的选拔，促进基因工程课程教学质量的提高。考试对象为2011年起参加我校硕士研究生入学基因工程考试的考生。
二、考试基本要求
要求学生比较系统的理解和掌握基因工程的基本原理、单元操作和应用战略，掌握基因的高效表达原理、重组表达产物的活性回收原理、基因工程菌（细胞）的稳定生产原理、DNA的切接反应、重组DNA分子的转化、转化子的筛选与重组子的鉴定等内容，能综合运用所学知识分析和解决以大肠杆菌、酵母等基因工程受体系统为主线的实验案例，并熟悉蛋白质工程和代谢工程的基本原理和应用。笔试内容包括具体实验方法。
三、考试方法和考试时间
硕士研究生入学基因工程考试为笔试，总分150，考试时间为3小时。
四、参考书
《基因工程（第2版）》张惠展 主编，高等教育出版社（2010年1月出版）
或《基因工程》张惠展 主编，华东理工大学出版社（2005年8月出版）
五、试题类型
1、单项选择题（每题2分，共20分）
2、填空题（每空1分，共25分）
3、名词解释（每题5分，共30分）
4、简答题（每题6分，共30分）
5、综合题（每题15分，共45分）
六、考试内容、考试要求
第一部分 DNA重组克隆的单元操作（40%）
掌握：质粒载体；限制性核酸内切酶、DNA分子重组的方法；重组DNA转化的基本概念、转化方法、转化率及其影响因素、转化细胞的扩增；基于载体遗传标记的筛选与鉴定、基于克隆片段序列的筛选与鉴定；PCR扩增法、基因文库的构建。
熟悉：噬茵体DNA载体；T4-DNA连接酶、DNA切接反应的影响因素；受体细胞的选择；基于外源基因表达产物的筛选与鉴定；鸟枪法、cDNA法、化学合成法。
第二部分 大肠杆菌及其它原核生物基因工程（30%）
掌握：启动子、终止子、SD序列、密码子、质粒拷贝数；细菌生长的动力学原理、发酵过程的最优化控制、基因工程菌的高密度发酵；基因工程菌的遗传不稳定性及其对策；利用重组菌生产氨基酸、有机酸等生物基产品。
熟悉：包含体型异源蛋白的表达、分泌型异源蛋白的表达、融合型异源蛋白的表达、寡聚型异源蛋白的表达、整合型异源蛋白的表达、蛋白酶抗性或缺陷型表达系统的构建；包含体的溶解与变性、异源蛋白的复性与重折叠。
第三部分 酵母及其它真核生物基因工程（5%）
熟悉：酵母的宿主系统、载体系统、转化系统、表达系统、蛋白修饰分泌系统。
第四部分 蛋白质工程与代谢工程基础（5%）
熟悉：蛋白质工程和代谢工程的原理与应用。
第五部分 实验（20%）
掌握：实验原理、操作、现象、仪器的使用方法。
实验一：氯化钙法大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验二：质粒DNA的提取
实验三：琼脂糖凝胶电泳
实验四：细菌基因组DNA的提取
实验五：质粒DNA限制性内切酶实验
实验六：重组DNA的PCR扩增
实验七：胶回收法纯化DNA
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