中药鉴定学导论

　　课程编号：305303　

　　开课单位：药学院中药鉴定教研室

　　任课教师姓名及职称：陈科力教授、张秀桥副教授、陈振江副教授、刘合刚副教授

　　授课学期：第一学年第二学期

　　学时学分：40学时，2学分

　　教学方式：以课堂讲授为主，结合图书馆最新资料查阅、采用讨论式教学方法。

　　考核方式：以教学内容为对象，撰写相关科研论文一篇，作为评分标准。

　　教材及主要参考书目：

　　本院教研室自编讲义

　　一、本课程教学目的和任务

　　中药鉴定学是一门综合利用生物学、中药化学、中药药理学、分子生物学、生物化学等各种技术方法对中药的品种，资源和质量进行研究的学科。开设该课程的目的是使学生了解在中药鉴定学前沿研究的一些新方法，新进展以及部分具体事例，以拓宽学生的视野、提高学生分析问题解决问题的能力，并能自觉运用所学的知识解决中药现代化的难题。

　　二、课程教学的基本要求与内容提要

　　一）绪论（3学时）

　　系统介绍中药鉴定学的发展进程，研究内容和研究方向，介绍各种新方法在中药鉴定中的应用，包括各种指纹图谱方法，蛋白质电泳方法，分子标记方法等，介绍定量鉴别方法的发展趋势，有关研究的最新成果。

　　二）中药资源研究（4学时）

　　介绍资源保护、资源调查、资源研究的方法，重点介绍新资源研究过程中一些新的生化药理学方法，如酶抑制剂的筛选，基因调空程度的测定方法。

　　三）数码显微摄影和显微图象处理（6学时）

　　1.植物粉末显微特征摄影；

　　2.植物组织显微特征摄影；

　　3.显微图象的处理；

　　4.墨线图制作及扫描技术：

　　5.药材图片制作。

　　要求学生通过动手实践，从组织切片、粉末片的制作，典型特征的确定，到摄影、绘图等、掌握常用的生药学显微分析方法。

　　四）光谱分析方法在中药鉴定上的应用（3学时）

　　介绍紫外光谱、红外光谱、x-衍射光谱等光谱法用于中药鉴定的原理，方法和实例。

　　五）色谱分析方法在中药鉴定上的应用（4学时）

　　介绍TLC、GC、HPLC等方法用于中药鉴别的实际技术、方法和实例，重点介绍各种中药指纹图谱建立的方法。

　　六）分子生物学分析法（10学时）

　　1.基本原理

　　2.蛋白质肽谱分析法

　　3.植物DNA提取和分析

　　4.PCR-RAPD分析法

　　5.PCR-RFCD分析法

　　6.叶绿体rbcl基因序列分析

　　7.琼脂糖电泳技术和摄相分析

　　七）高效电泳技术及其应用（10学时）

　　带电颗粒在外电场的作用下，　向着与其所带电荷相反方向流动的现象称为电泳，（Electrophoresis），自Tiselins于1937年提出改良的移动界面仪器以来，随着仪器本身的方法学的进展，电泳技术的应用范围概括了从最大的蛋白质分子，直到如氨基酸、抗生素、糖、嘌吟、嘧啶甚至简单的无机离子等整个领域，许多中药的有效成分或杂质如带电荷的蛋白质，生物碱或有机酸以及不带电荷的成分如糖、三萜类（可利用其生成衍生物的方法使之带电荷）均可以进行电泳分析。

　　1.介绍电泳技术的基本原理（1学时）　

　　电泳分离法一般是根据以下二点而展开的；一是根据与药物分子大小和净电荷数有关的泳动率；二是依据电荷而与药物分子的大小无关的电泳分离法。

　　2.电泳载体的选择（1学时）

　　纸电泳，琼脂糖的凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝胶电泳等各电泳技术，所应用的电泳载体的特点和用途。

　　3.聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）（2学时）

　　讲解比类凝胶的制备方法，结合实例，讨论PAGE的具体操作方法，原理，技术特点，注意事项和仪器设备的配置等。

　　4.十二烷基硫酸钠一PAGE。（SDS-PAGE）（2学时）

　　讨论SDS-PAGE技术的技术特点，试剂的配制，样品液的制备，垂直板型凝胶和柱型凝胶的制备方法，结合实例，讲解法SDS-PAGE所得的电泳图谱及相应的分子量数。

　　5.等电聚焦电泳（1FE）（2学时）

　　a.讨论1FE的技术特点及与PAGE。SDS—PAGE大小的操作方法，包括样品液的制备，试剂的配制、制胶及点样方法，蛋白质分子量标准溶液的选择与配制，标准曲线的绘制，结合实例进行IFE电泳图谱的分析。

　　b.讨论薄层等电聚位电泳的操作方法：电泳槽的选择与配置，制胶，点样方法。：工作电压，电流的选择控制等。

　　6.DNA的凝胶电泳分析2h（2学时）

　　介绍以PAG为载体的DNA电泳操作方法，包括电泳槽的配置，半透膜透析袋的选择与使用，各种试剂的配制及注意事项等。